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皮膚反應(yīng)(致敏)試驗(yàn)儀

  皮膚反應(yīng)(致敏)試驗(yàn)儀
 
  一、 儀器介紹
 
  實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
 
  確定重復(fù)接觸受試物對(duì)哺乳動(dòng)物是否可引起皮膚反應(yīng)及其程度
 
  試驗(yàn)概述:
 
  局部封閉涂皮試驗(yàn)(Buehler test,BT)和豚鼠最大值試驗(yàn)(uinea pig maximisation test,GPMT)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過多次皮膚涂抹(誘導(dǎo)接觸)或皮內(nèi)注射受試物10d~14d(誘導(dǎo)階段)后,給予激發(fā)劑量的受試物,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,并與對(duì)照動(dòng)物比較對(duì)激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度。
 
  小鼠局部淋巴結(jié)分析試驗(yàn)(locallymph node assay,LLNA)是通過耳部給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受試物,引起淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞增生,淋巴細(xì)胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標(biāo)記方法,測(cè)定試驗(yàn)組與對(duì)照組淋巴細(xì)胞的標(biāo)記率,并進(jìn)行對(duì)比,獲得刺激指數(shù),評(píng)價(jià)致敏強(qiáng)度。應(yīng)用范圍
 
  應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個(gè)領(lǐng)域
 
  二、試驗(yàn)步驟:
 
  1. Buehler TestBT
 
  動(dòng)物模型:豚鼠
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:通過封閉式皮膚涂抹受試物,持續(xù)10-14天。激發(fā)階段:間隔后再次涂抹受試物,觀察皮膚反應(yīng)。
 
  觀察指標(biāo):紅斑、水腫等皮膚炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度(主觀評(píng)分)
 
  優(yōu)點(diǎn):
 
  模擬人類皮膚接觸途徑,適用于局部制劑(如化妝品、外用藥物)
 
  無需注射,操作相對(duì)溫和。
 
  缺點(diǎn):
 
  敏感性較低,可能漏檢弱致敏物,依賴主觀評(píng)分,存在實(shí)驗(yàn)者偏差。0應(yīng)用場(chǎng)景:傳統(tǒng)化妝品、外用藥品的安全性評(píng)估。
 
  2.豚鼠最大值試驗(yàn)(GPMT)
 
  動(dòng)物模型:豚鼠
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:皮內(nèi)注射受試物(常聯(lián)合弗氏佐劑)結(jié)合皮膚涂抹,持續(xù)10-14天。
 
  激發(fā)階段:再次涂抹受試物,評(píng)估皮膚反應(yīng)。
 
  觀察指標(biāo):與BT類似,但反應(yīng)更強(qiáng)烈(紅斑、水腫、硬結(jié))
 
  優(yōu)點(diǎn):
 
  敏感性高,可檢測(cè)強(qiáng)致敏物和弱致敏物;
 
  國(guó)際的“金標(biāo)準(zhǔn)”,尤其適用于化學(xué)品和工業(yè)原料。
 
  缺點(diǎn):
 
  使用佐劑可能引發(fā)過度免疫反應(yīng),導(dǎo)致假陽(yáng)性;
 
  動(dòng)物痛苦程度較高,倫理爭(zhēng)議較大。
 
  應(yīng)用場(chǎng)景:工業(yè)化學(xué)品、強(qiáng)致敏性物質(zhì)(如染發(fā)劑、橡膠添加劑)的嚴(yán)格檢測(cè)。
 
  3.小鼠局部淋巴結(jié)試驗(yàn)(LLNA)
 
  動(dòng)物模型:小鼠.
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:連續(xù)3天耳部涂抹受試物。
 
  檢測(cè)指標(biāo):通過3H-胸苷或BrdU標(biāo)記增殖的淋巴細(xì)胞,計(jì)算刺激指數(shù)(SI)觀察指標(biāo):淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞增殖程度(SI>3判為陽(yáng)性)
 
  優(yōu)點(diǎn):
 
  客觀定量:減少主觀評(píng)分誤差;
 
  符合3R原則:動(dòng)物用量少,無需激發(fā)階段,痛苦小;
 
  高效快速:試驗(yàn)周期短(約1周)。
 
  缺點(diǎn):
 
  對(duì)某些物質(zhì)(如金屬鹽)敏感性不足,需使用放射性物質(zhì)或特殊設(shè)備,成本較高。
 
  應(yīng)用場(chǎng)景:歐盟等法規(guī)優(yōu)先推薦的替代方法,廣泛用于藥品、化妝品及化工產(chǎn)品的初篩。
 
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